Systém analýzy kanabinoidů AlphaCat | AlphaCat Cannabinoid Analysis | S.Béguerie
Komparativní studie pro kvantifikaci THC, CBD a CBN mezi ALPHA-CAT TLC protokolem a GC-FID, kterou prezentoval Sébastien Ludovic Béguerie (MSc Plant Sciences, Canébe – Francie) na Cannafestu 2013.
Abstrakt:Po celém světě roste spotřeba konopí, což neustále zesiluje potřebu prevence rizik a porozumění terapeutické hodnotě a možným vedlejším účinkům konopí. Uznávané analytické metody jsou nákladné a vyžadují značné vědecké zázemí, což značně omezuje jejich využitelnost. Proto zde vzniká potřeba nenákladných technik, které by umožnily rozsáhlé testování v konopném průmyslu. U technického konopí je pro vládní úředníky zapotřebí certifikace o minimálním obsahu THC, na jejímž základě pak může více farmářů pěstovat konopí k průmyslovým účelům. A obdobně v oblasti léčebného konopí je zapotřebí znát obsah příslušných kanabinoidů, aby bylo možno správně určit terapii a předejít rizikům. Alpha-CAT je testovací balíček pro analýzu kanabinoidů (Cannabinoid Analysis Test), který využívá chromatografii na tenké vrstvě (TLC), jež umožňuje identifikovat 6 základních kanabinoidů: CBD, CBN, THC, THCV, CBG a CBC. Byl vyvinut podle publikace od Fishedicka a kol. z roku 2010 vydané na Leiden University v Nizozemí. V protokolu alpha-CAT jsou TLC destičky vyvolávány pomocí roztoku Fast Blue B soli. Pro kvantifikaci jsou použity čisté kanabinoidní referenční standardy (THC, CBD a CBN). Na křemičitých G25 TLC destičkách byly připraveny a pozorovány koncentrace v rozmezí 1 % až 20 %. Kvantifikace bylo dosaženo pomocí počítačových programů Photoshop a Excel použitím poměru počet pixelů/plocha povrchu. Byla získána regresní křivka, která ukázala lineární korelaci. Z této regresní křivky byly vytvořeny kalibrační stupnice pro THC, CBD a CBN, které představují praktický, vizuální způsob měření procent podle velikosti bodu na destičkách. Byla provedena komparativní studie mezi Fundación CANNA (Nadace CANNA, FC), která používala plynovou chromatografii s plamenově ionizačním detektorem (Gas Chromatography – Flame Ionization Detector, GC-FID), a alpha-CAT balíčkem pro kvantifikaci THC, CBD a CBN.
Metoda: K testování byly použity 4 homogenizované balíčky různých konopných odrůd. Tři vzorky z každého balíčku byly analyzovány metodou TLC a tři metodou GC-FID. Laboratorní procedury byly provedeny v prostorách Nadace CANNA a výsledky TLC byly slepě testovány zasláním oskenovaných obrázků destiček do alpha-CAT laboratoře v Marseille pro kvantifikaci kanabinoidů za použití kalibrační stupnice alpha-CAT.
Výsledky: Byly porovnány průměrné procentní podíly všech vzorků. Při porovnání testovací metody TLC s metodou GC-FID byly u kvantifikace THC zjištěny rozdíly v rozmezí 15,40 % a 48,82 %, u CBD to bylo 34,25 %. Poměr THC : CBD byl proporcionálně srovnatelný. Pro obsah CBD pod 1 % a CBN se u kvantifikace objevila inkoherence, ačkoliv byly detekovány správně.
Závěr: Jednalo se o první specificky zaměřenou komparativní studii mezi protokoly GC-FID a TLC alpha-CAT. Testovací metoda alpha-CAT se ukázala být platným kvalitativním nástrojem pro detekci kanabinoidů, poskytujícím reprodukovatelné výsledky. Nicméně pouze techničtí pracovníci dobře vyškolení na protokol alpha-CAT mohou pomocí kanabinoidních kalibračních stupnic alpha-CAT získat semi-kvantitativní výsledky. Pro přesnou kvantifikaci kanabinoidů i dalších sekundárních aktivních složek obsažených v konopí je nutno použít plynovou nebo kapalnou chromatografickou analýzu.
Nenechte si ujít letošní konferenci na veletrhu Cannafest, který se bude konat ve dnech 6.-8.11. 2015 na výstavišti Incheba v Praze.
Informace & vstupenky:
http://www.cannafest.cz/
Sledujte aktuality na Facebooku:
https://www.facebook.com/Cannafest
//
Comparative study for the quantification of THC, CBD and CBN between ALPHA-CAT TLC protocol and GC-FID. Presented by Sébastien Ludovic Béguerie, MSc in Plant Sciences – Canèbe (France). Alpha-CAT is a Cannabinoid Analysis Test KIT using Thin Layer Chromatography (TLC) that enable to identify the 6 main cannabinoids, CBD, CBN, THC, THCV, CBG, CBC.
Don’t miss the next Cannafest conference, 6th – 8th November 2015 in Prague. All lectures are held in Czech or English and are simultaneously translated.
Information & Tickets:
www.cannafest.cz
Follow us on Facebook:
https://www.facebook.com/Cannafest
source